Contribution à l’étude des mécanismes régulateurs de la synthèse du lait chez la chèvre : étude des effets de l’AGTA, du citrate et des hydrolysats de caséines PDF Download
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Book Description
La monotraite est une des solutions qui s’offre aux éleveurs pour réduire l’astreinte quotidienne de la traite, mais elle engendre une baisse de la production laitière. Ce travail vise à tester plusieurs hypothèses sur les mécanismes qui sont à l’origine de cette baisse, dont l'action des équilibres calciques et leurs conséquences sur la perméabilité de l'épithélium mammaire et la production et qualité du lait. Nous avons donc testé in vitro et in vivo chez la chèvre, l'effet de chélatantion du Ca2+ tel que Citrate, EGTA et Caséinophosphopeptides issu de l'hydrolyse des caséines, injectés unilatéralement dans la mamelle en comparaison à une solution vectrice témoin. Il ressort de notre étude que le citrate n'a pas eu d'effet significatif sur le lait et les taux à l'inverse des deux autres substances qui ont un effet inhibiteur réversible alors que leurs effets sur le Ca2+ sont très différents suggérant que les modes d'actions sont donc différents. L'effet hydrolysat semble plus orienté vers une réponse immunitaire/inflammatoire de long terme alors que l'inhibition forte et transitoire du lactose du lait sous EGTA suggère un effet plus directement orienté via la régulation de l'expression génique. Dans tous les cas les jonctions serrées pourraient s'être ouvertes entraînant protéolyse et afflux de protéines sériques comme l'albumine et la plasmine. Un effet facilitant net du volume injecté sur l'inhibition induite par l'EGTA à été mis en évidence. Un résultat inattendu a été l'effet significatif de l'injection de solution de lactose comme témoin qui a été très efficace pour freiner la production du lait sans que nous ayons aujourd'hui d'explication à ce phénomène. Il reste de nombreuses analyses histologiques et d'expression génique à faire avant de pouvoir conclure plus avant sur les voies d'actions mises en jeu par ces différentes substances.
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La monotraite est une des solutions qui s’offre aux éleveurs pour réduire l’astreinte quotidienne de la traite, mais elle engendre une baisse de la production laitière. Ce travail vise à tester plusieurs hypothèses sur les mécanismes qui sont à l’origine de cette baisse, dont l'action des équilibres calciques et leurs conséquences sur la perméabilité de l'épithélium mammaire et la production et qualité du lait. Nous avons donc testé in vitro et in vivo chez la chèvre, l'effet de chélatantion du Ca2+ tel que Citrate, EGTA et Caséinophosphopeptides issu de l'hydrolyse des caséines, injectés unilatéralement dans la mamelle en comparaison à une solution vectrice témoin. Il ressort de notre étude que le citrate n'a pas eu d'effet significatif sur le lait et les taux à l'inverse des deux autres substances qui ont un effet inhibiteur réversible alors que leurs effets sur le Ca2+ sont très différents suggérant que les modes d'actions sont donc différents. L'effet hydrolysat semble plus orienté vers une réponse immunitaire/inflammatoire de long terme alors que l'inhibition forte et transitoire du lactose du lait sous EGTA suggère un effet plus directement orienté via la régulation de l'expression génique. Dans tous les cas les jonctions serrées pourraient s'être ouvertes entraînant protéolyse et afflux de protéines sériques comme l'albumine et la plasmine. Un effet facilitant net du volume injecté sur l'inhibition induite par l'EGTA à été mis en évidence. Un résultat inattendu a été l'effet significatif de l'injection de solution de lactose comme témoin qui a été très efficace pour freiner la production du lait sans que nous ayons aujourd'hui d'explication à ce phénomène. Il reste de nombreuses analyses histologiques et d'expression génique à faire avant de pouvoir conclure plus avant sur les voies d'actions mises en jeu par ces différentes substances.
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. Divers facteurs sont proposés pour la régulation locale de la sécrétion du lait chez la chèvre. Parmi eux, le Feedback Inhibitor of Lactation (FIL) qui serait une glycoprotéine du lactosérum de 7,6 kDa et un caséinophosphopeptide (CPP), le fragment 1-28 de la caséine β. Le mécanisme d'action du FIL passerait par une déstabilisation de réseau transgolgien des cellules épithéliales mammaires, voire l'inhibition de certains gènes. Le fragment de la caséine serait capable de rompre les jonctions serrées en modifiant la concentration extracellulaire en calcium. La première partie de notre travail a consister à tenter de purifier le FIL à partir de lait de chèvre d'après le brevet déposer par Addey et al. en 1998. La purification de CPP caprins natifs et enrichis en calcium puis la réalisation d'une expérimentation sur des chèvres par injections intramammaires de ces CCP caprins contenant le β 1-28, de CPP du commerce et d'EGTA a constitué notre seconde partie du travail. La mise au point de la mesure de l'activité de la plasmine, une protéinase du lactosérum, a clôturé notre travail. Nous n'avons pas retrouvé le pic en FPLC censé contenir le FIL dans la fraction 10-30 kDa du lactosérum, et une analyse par LC/MS n'a pas révélé de pic d'une masse de 7,6 kDa. Un effet sur l'inhibition de la production lait est apparu sur les chèvres traitées avec des CPP natifs de chèvre. Laissant envisager que le fragment β 1-28 pourrait bien avoir un rôle de régulation dans la sécrétion du lait. La mesure de l'activité de la plasmine dans le lait par la méthode de la gamme d'étalonnage semble être prometteuse mais nécessite des essais dans des matrices laitières.
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16 LAITS DE PETIT MELANGE, REPARTIS EN 2 GROUPES EN FONCTION DU TYPE DE VARIANT DE LA CASEINE ALPHA S1, GROUPE A : VARIANTS A FORT TAUX DE SYNTHESE DE CASEINE ALPHA S1, GROUPE B : VARIANTS A FAIBLE TAUX DE SYNTHESE, ONT ETE ANALYSES AU PLAN DES CARACTERISTIQUES PHYSICO-CHIMIQUES ET DES APTITUDES FROMAGERES. CELLES-CI ONT ETE APPRECIEES PAR L'ETUDE DU COMPORTEMENT DES LAITS VIS-A-VIS DE LA PRESURE ET PAR LA REALISATION DE DEUX TYPES DE MICROFABRICATIONS FROMAGERES MODELES, A COAGULATION RAPIDE, ET A COAGULATION LENTE. PARMI LES CARACTERISTIQUES PHYSICO-CHIMIQUES ON PEUT CONSTATER CERTAINES DIFFERENCES ENTRE LES LAITS : LE GROUPE A PRESENTE UNE PROPORTION PLUS IMPORTANTE DE CASEINES ALPHA S TOTALES, UN RAPPORT AZOTE NON PROTEIQUE / AZOTE TOTAL MOINS ELEVE ET DES DIMENSIONS MICELLAIRES PLUS FAIBLES QUE LES LAITS DU GROUPE B. LE GROUPE A MONTRE, EGALEMENT, UNE MEILLEURE APTITUDE A LA COAGULATION PAR LA PRESURE ET A L'EGOUTTAGE ET EST A L'ORIGINE DE RENDEMENTS FROMAGERS SENSIBLEMENT PLUS ELEVES. LA CONCENTRATION EN PROTEINES DES LAITS PAR ULTRAFILTRATION A UN EFFET SIGNIFICATIF SUR LA FERMETE DU GEL-PRESURE ET SUR LE RENDEMENT FROMAGER. UN TAUX DE CONCENTRATION EN VOLUME DE 10 A 15% PERMET DE COMPENSER L'ECART DE COMPORTEMENT OBSERVE ENTRE LES LAITS DU GROUPE A ET CEUX DU GROUPE B. L'ADDITION DE CALCIUM, CONTRAIREMENT A CE QUI PEUT ETRE OBSERVE SUR LAIT DE VACHE, N'AFFECTE PRATIQUEMENT PAS LE COMPORTEMENT FROMAGER. L'ASSOCIATION CONCENTRATION PAR ULTRAFILTRATION / ADDITION DE CALCIUM N'AMELIORE PAS LES APTITUDES FROMAGERES DES LAITS, PAR RAPPORT A L'EFFET DE LA CONCENTRATION SEULE. L'ACIDIFICATION DES LAITS DE TRADUIT PAR UNE DIMINUTION DU TEMPS DE PRISE ET UNE AUGMENTATION DE LA FERMETE ET DE LA VITESSE DE RAFFERMISSEMENT DES GELS JUSQU'A PH 6.2. AU-DESSOUS DE CETTE VALEUR, LA DEMINERALISATION DES MICELLES ENTRAINE UN EFFET INVERSE.
Author: Ryma Bounamous
Author: Ryma Bounamous
Author: Aurélie Foisnet
Author: Inigo Verdalet-Guzman